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发布时间:2020-08-31 00:09:01
MTT检测法,细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶,能使额外添加的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中,死细胞则无此现象。接着用二甲亚砜(DMSO)溶解沉积在细胞中的甲瓒后,可利用酶标490nm波长测光吸收值,依据吸光值(OD值)计算出细胞数量。在一定细胞数范围内,吸光值与细胞活性成正比。
细胞培养时可能导致***的原因:1.细胞传代次数比较多,一定要控制细胞传代次数!大量扩增细胞,将细胞进行冻存,在必要的时候重新复苏。2.胰酶消化时间太长,胰酶消化时间过长容易导致细胞状态不佳以及胞质疏松;细胞传代时需要留意胰酶消化的时间。消化过度,在消化细胞时会对细胞的表面蛋白有较强的损伤,所以消化的时间不能过长,建议使用合适浓度和pH值的消化酶,否则会导致细胞***和分化。
原核细胞(Prokaryotic cell)没有核膜,遗传物质集中在一个没有明确界限的低电子密度区,称为拟核(nucleoid)。DNA为露的环状分子,通常没有结合蛋白,环的直径约为2.5nm,周长约几十纳米。大多数原核生物没有恒定的内膜系统,核糖体为70S型,原核细胞构成的生物称为原核生物,均为单细胞生物。组成原核生物的细胞。这类细胞主要特征是没有明显可见的细胞核,同时也没有核膜和核仁,只有拟核,进化地位较低。
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