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发布时间:2020-08-12 23:22:08
结合BI生产的基础培养基,Minimal Essential Medium是基本的培养基, 设计之初是为了培养HeLa细胞以及部分哺乳类的成纤维细胞。MEM含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种***,适合多种细胞单层生长。以MEM为基础,Stanner利用Earle'sBalanced Salts和非必需胺基酸(NEAA)进一步配制成MEM-Alpha培养基,可广泛用于哺乳动物细胞的培养。
MTT检测法,细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶,能使额外添加的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中,死细胞则无此现象。接着用二甲亚砜(DMSO)溶解沉积在细胞中的甲瓒后,可利用酶标490nm波长测光吸收值,依据吸光值(OD值)计算出细胞数量。在一定细胞数范围内,吸光值与细胞活性成正比。
当需要进行细胞共培养、细胞趋化、细胞迁移以及细胞侵袭等研究的时候,需要在培养板上放入小室。小室内通称上室,培养板内则称下室,小室的底部有通透性的膜,一般常用聚碳酸酯膜(PC);根据实验需求选择不同孔径的聚碳酸酯膜, 并且经过不同处理,就可以进行上述的实验。因为聚碳酸酯膜具有通透性,下层培养液中的诱导性成分或是趋化因子,可以影响到上室内的细胞功能,不同厂家对小室的命名也不同,如Transwell、Boyden chamber、Millicell或是Thincert。
***细胞的细胞器发生变化,如高尔基体和溶酶体数量增多、体积增大,导致细胞质内颗粒明显增多。细胞培养时可能导致***的原因:1.细胞密度过高或过低,细胞过密产生接触作用,导致细胞的活力减弱以及细胞增殖减慢,后出现***。2.长时间未更换细胞培养基.3.使用劣质细胞培养***,使用合适的培养基,不同的细胞对培养基的要求不同,所以筛选适合细胞培养的培养基,预防细胞***,维持细胞正常生长。
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