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发布时间:2020-07-14 21:30:23
细胞培养小妙招
1、勤换水,水浴锅很脏,细胞培养箱要是得手动加湿的话,盘里的水也会很脏。那种公用的水浴锅、培养箱,定期换水习惯不好的,交叉污染严重的,那就可以选择一些绿色、安全、无刺激性的chu菌剂,改善一下,免得细胞遇到污染时措手不及。
2、勤擦洗,培养箱隔一段时间彻底用安全出菌剂擦洗一次,有人用酒精擦洗,但毕竟究竟只能除掉***,对于***是没有办法sha死的,所以这里推荐大家选用效果和口碑都不错的chu菌剂处理。
3、勤清洁,细胞房日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸。
***中可能出现的沉淀物是什么?
基于多年的实验研究,用于细胞培养的胎牛***以及其它***中可能会存在以下种类的沉 淀物:(1)纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到 1-2mm,可以用肉眼观察到。 因为***都是在低温下进行收集和快速处理的,一些纤维蛋白原(可溶性的形成絮状纤维蛋白 的前体)在处理过程中仍然处于溶解状态,当经过***后的过滤分装后,就会在瓶中凝结出现纤 维蛋白沉淀。(2)磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使***出现浑浊,并且在 37℃ 培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。(3)胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。他们 也是***中出现沉淀物的常见原因。
为何培养基保存于 4°C 冰箱中,颜色会偏暗红色,且 pH 值会越来越偏碱性?
培养基保存于 4°C 冰箱中,培养基内之 CO2 会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性。而 培养基中之酸碱指示剂(通常为 phenolred)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之 结果,将造成细胞生长停滞或si亡。若培养基偏碱时,可以通入无菌过滤之 CO2,以调整 pH 值。
胎牛***的使用要注意哪些
1、***的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
2、若必须做***的热灭活,请遵守56。C,30分钟的原则,并且随时摇 晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。 [5]***解冻后发 现有絮状沉淀物出现,该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物,可以将***分装至无菌离 心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方 法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。
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