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发布时间:2020-05-20 23:46:07
而Frances Arnold的主要贡献,也就是所谓“定向进化”(directed evolution),主要内容是快速获得具有高度多样性的酶结构库,并加以高通量筛选过程。从酶结构的来源——DNA入手,通过***工程的方法,在DNA编码层面上进行高度重组,均匀而***地获得突变,从而得到一个DNA库;而后经PCR扩增,再进行转录与翻译,即可获得不同形式的多肽链;实验人员再从中筛选出来符合需要的蛋白质,并进一步循环改进,直至符合要求。
胃蛋白酶作用于铰链区二硫键所连接的两条重链的近c端,水解Ig后可获得一个F(ab’)2片段和一些小片段pFc ’。F(ab’)2是由两个Fab段及铰链区组成,由于Ig分子的两个臂仍由二硫键连接,因此F(ab’)2片段为双价,可同时结合两个抗原表位,与抗原结合可发生凝集反应和沉淀反应。由于F(ab’)2片段既保留了结合相应抗原的生物学活性,又避免了Fc段免yi原性可能引起的***,因而被广泛用于制备生物制品,如bai喉抗du素、破shang风抗du素均是经胃蛋白酶消化后精制提纯的生物制品。胃蛋白酶水解Ig后所产生的pFc 7***终被降解,无生物学作用
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